1. 概要: 3T3-L1 とは
2. 培養、分化誘導のプロトコール
3. Mitotic clonal expansion について
4. 分化の阻害および促進

概要: 3T3-L1 cell

3T3-L1 は マウス に由来する脂肪前駆細胞株であり、脂肪細胞 adipocyte の研究に最もよく使われている細胞である。

培養、分化誘導プトロコール

10% FBS を含む培地で培養し、コンフルエントになると細胞同士の contact inhibition によって増殖が停止する。この状態でインスリン、デキサメタゾン (DEX)、イソブチルメチルキサンチン (IBMX) を添加すると、1 - 2 回の細胞分裂が起こり、脂肪細胞へと分化する。この細胞分裂を mitotic clonal expansion という。

Mitotic clonal expansion

Mitotic clonal expansion は 3T3-L1 では脂肪細胞分化の開始に必要であるが、そうでないとする意見もある。ヒトの脂肪細胞ではさらに不明な点が多い。

• These results show that MCE is a prerequisite for differentiation of 3T3-L1 preadipocytes into adipocytes (4).
• Whether ‘mitotic clonal expansion’ is required for differentiation is controversial; however, it is clear that some of the checkpoint proteins for mitosis also regulate aspects of adipogenesis (5).
• It is uncertain whether primary preadipocytes prepared from human fat pads have already undergone mitotic clonal expansion in vivo (3).

分化の阻害

実に多くの報告がある。

• Dimethylfumarate (1): STAT3 を介している
• Ursolic acid (2): LKB/AMPK pathway を介している

分化の促進

• 活性酸素 ROS (3): 高濃度の ROS はもちろん細胞を傷つけ、ときにはアポトーシスを誘導するが、低濃度の ROS はむしろ分化や分裂を促進するという報告が多い。

References

1. Kang et al. 2013a. Dimethylfumarate suppresses adipogenic differentiation in 3T3-L1 preadipocytes through inhibition of STAT3 activity. PLoS ONE 8, e61411.
2. He et al. 2013a. Ursolic acid inhibits adipogenesis in 3T3-L1 adipocytes through LKB1/AMPK pathway. PLoS ONE 8, e70135.
3. Lee et al. 2009a. Reactive oxygen species facilitate adipocyte differentiation by accelerating mitotic clonal expansion. J Biol Chem 284, 10601-10609.
4. Tang et al. 2002a. Mitotic clonal expansion: a synchronous process required for adipogenesis. PNAS 100, 44-49.
5. Rosen et al. 2006a. Adipocyte differentiation from the inside out. Nat Rev Mol Cell Biol 7, 885-896.

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